虽然标准巴氏消毒可以减少牛奶中的H5N1病毒，但这项研究表明，一些病毒株仍然具有弹性，因此需要进一步检测以确保商业牛奶供应的安全性。

　　在最近发表在《新发传染病》杂志上的一项研究中，研究人员评估了高致病性甲型H5N1禽流感病毒在类似巴氏杀菌的温度下对牛奶的抵抗力，并评估了热灭活的有效性。

　　H5N1流感在许多鸟类种群中是地方性的，并可感染包括人类在内的哺乳动物，在某些情况下导致严重或致命的后果。

　　在美国奶牛中发现H5N1病毒引起了重大的公共卫生关注。巴氏杀菌法是一种广泛使用的确保牛奶安全的方法，它包括加热牛奶以消除有害细菌。在美国，低温长时间(LTLT)和高温短时间(HTST)巴氏灭菌是常见的工艺。然而，最近的研究显示了类似巴氏消毒条件的效果的相互矛盾的结果，表明来自感染h5n1的奶牛的未经巴氏消毒的牛奶可能含有足够的病毒来感染易感动物。这些发现突出了对人类健康的潜在风险，需要进一步研究以充分了解病毒的复原力并改进安全措施。

　　研究人员评估了不同温度对牛奶中流感病毒活力的影响。值得注意的是，实验中使用的试管条件并不能精确地复制乳制品行业的实际巴氏灭菌过程，这是该研究的一个关键限制。该研究使用了四种流感病毒毒株:一种实验室适应毒株(PR8)和三种H5N1毒株。在市售的巴氏消毒全脂牛奶(3.25%脂肪)中加入浓度为108 50%的组织培养感染剂量/mL的牛奶或优化的最低基本培养基(Opti-MEM)对照培养基中的病毒株。样品经过三种不同的热处理:63°C 30分钟，72°C 20秒，91°C 20秒。

　　采用不同的加样量(200 μL、20 μL和2 μL)来评估加样量对热处理效果的影响。此外，PR8菌株在巴氏灭菌和未巴氏灭菌的牛奶中进行了测试，以检查在暴露于HTST条件前在37°C下预热1分钟的牛奶的影响。热处理后，将样品调整至终体积200 μL，滴定测定病毒活力。

　　H5N1在人与人之间的传播仍然罕见，但该病毒被视为重大的大流行威胁。

　　研究人员发现，在对照培养基中稀释的流感病毒和在牛奶中稀释的流感病毒的病毒滴度没有显著差异。所有测试的三种病毒——PR8、VN/04 ΔH5N1和ty/IN/22——表现相似。然而，必须强调的是，这些发现是基于受控的实验室环境，可能无法完全捕捉现实世界乳制品加工的复杂性。在63°C下热处理30分钟，有效地将病毒活力降低到检测极限以下。在72°C作用20秒时，滴度降低与样品体积成反比，在200 μL样品中滴度降低不显著，但在20 μL和2 μL样品中滴度降低显著。在91°C处理20秒时观察到类似的趋势，其中较小的样品体积显示更大的病毒失活。在应用HTST条件前，将样品预热至37°C 1分钟可加速病毒失活，特别是在小体积中。

　　该研究进一步探讨了不同类型的牛奶和储存温度对病毒稳定性的影响。经过巴氏消毒、未经巴氏消毒的初乳和成熟乳都加入了病毒，并在不同的温度下储存了四天。在温度低于63°C的未经巴氏消毒的牛奶中，病毒的传染性保持了四天多，病毒在24小时内灭活。未经巴氏消毒的初乳显示出增强的病毒失活，可能是由于免疫球蛋白的存在，免疫球蛋白提供了一种天然的防御。

　　零售及未经巴氏消毒的牛奶中甲型流感的稳定性。我们在Opti-Mem对照培养基(Fisher Scientific, https://www.fishersci.com) (A)、零售现货巴氏全脂牛奶(B)或两种不同来源的未经巴氏消毒的牛奶:初乳(C)或成熟牛奶(D)中稀释甲型流感病毒。然后，我们在不同温度下培养200 μ l的样品数天，如图所示。随后，我们用TCID50在MDCK细胞中滴定样品。我们检测了3种毒株:PR8 (H1N1)、ty/IN/22 (H5N1)和TX/24 (H5N1)的反向遗传型。出生后最初几天生产的未经巴氏消毒的初乳含有高水平的免疫球蛋白和抗菌肽，可能对降低病毒存活率有影响。PR8 (H1N1)野生型毒株A/Puerto Rico/8/1934 (H1N1);RT，室温;TCID50, 50%组织培养感染剂量;TX/24野生型毒株A/Texas/37/2024 (H5N1);ty/IN/22，野生型高致病性A/turkey/Indiana/3707-003/2022 (H5N1)。

　　然而，一个关键的限制是，将病毒注入牛奶并不能完全复制自然感染情景的动态。包膜病毒，如流感，通常比非包膜病毒更不稳定，后者已在类似环境中进行了更彻底的研究。这一限制强调了进一步研究牛奶中病毒灭活在现实条件下的行为的必要性。

　　尽管有这些发现，但重要的是要认识到，在没有活病毒的牛奶样品中存在病毒核糖核酸(RNA)可能是由于现代检测方法的敏感性，而不是实际的风险。先前对类似高温高温的温度条件的研究得出了不同的结果。例如，一项研究发现，完全的病毒失活只发生在105°C，而另一项研究表明，使用HTST条件完全失活。这些相互矛盾的结果突出了病毒在不同热条件下恢复力的复杂性。目前的研究增加了有价值的见解，但必须在这些先前发现的背景下进行解释，强调了在该领域进一步研究的重要性。

　　有证据表明，高温高温灭菌法可以有效地灭活流感病毒，降低牛奶供应的风险。然而，由于前面讨论的实验限制，仍然需要谨慎，并且明确排除活病毒的存在可能需要在鸡蛋中进行多次盲传，这是监测研究中的标准。这项研究的发现，特别是关于PR8菌株的发现，可以作为评估商业巴氏灭菌过程的有价值的参考。尽管如此，该研究强调，为了确保这些工艺在工业条件下的稳健性，进一步的实际测试是必不可少的。了解影响病毒在牛奶中存活的因素将有助于指导干预措施，以提高牛奶安全性，并解决对新出现的病毒威胁的担忧。

　　总而言之，该研究表明，在标准温度下进行巴氏消毒，例如63°C 30分钟和72°C 20秒，可以降低H5N1在牛奶中的生存能力，特别是在较小体积的牛奶中。然而，必须考虑到该研究在实验条件和先前相互矛盾的数据方面的局限性。病毒失活在较小的样品体积中更为明显，并通过预热增强。此外，未经巴氏消毒的牛奶中病毒的韧性强调了在商业乳制品实践中警惕热处理过程的重要性。

　　2024年10月7日-期刊论文引文文本和1添加的墨水，最初因错误而省略